摘要
目的 探讨酵母抽提物(yeast extract,YE)FM888对CHO细胞生长的影响。方法 以CHO悬浮细胞为研究对象,在EmCD CHO? Medium培养基中分别添加1、2、3、5 g/L的FM888,进行摇瓶批式培养,台盼蓝拒染法和细胞计数仪测定活细胞密度和细胞活率。用添加1、2 g/L FM888的EmCD CHO?Medium培养基培养CHO细胞,生化分析仪检测细胞的生化代谢(葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺、谷氨酸和铵根离子的含量)情况;采用相应试剂盒检测乳酸脱氨酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的活力;流式细胞术检测细胞的周期分布及凋亡情况。结果 培养基中加入1、2 g/L的FM888可促进CHO细胞生长,确保培养过程中维持较高活细胞密度和细胞活率;CHO细胞培养前期,葡萄糖、乳酸和铵根离子在培养体系中的浓度均高于空白对照组(未添加FM888),谷氨酰胺低于空白对照组,能够促进细胞代谢活动,培养后期逐渐下降;可减少细胞损伤及CHO细胞酶的释放;可增加CHO细胞S期的比例,促进细胞增殖;可降低CHO细胞凋亡率。结论 培养基中添加1、2 g/L的FM888能促进CHO细胞的生长、代谢和增殖,并维持较高的细胞活力。
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单位三峡大学; 安琪酵母股份有限公司