腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

作者：黎常宏; 张丽铃; 王筱兰

来源：南昌大学学报(工科版), 2011, 33(04): 348-351.

• 腈水合酶
• 筛选
• 优化
• 产酶

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出一株能耐受4%丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11.5MU/mL,与优化前相比,酶活提高了49.35%。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为:初始pH 7.0、装液量16%、发酵周期58 h、接种量10%。最佳发酵培养基配方为:ρ(葡萄糖)=26 g/L,ρ(酵母膏)=2 g/L,ρ(尿素)=4 g/L,ρ(谷氨酸钠)=0.5 g/L,ρ(K2HPO4)=0.2 g/L,ρ(KH2PO4)=0.2 g/L,ρ(MgSO4)=0.05 g/L,φ(DXL)=0.5 mL/L。

• 单位
  江西师范大学; 生命科学学院; 南昌大学生命科学与食品工程学院