摘要

目的 研究miR-7977对2型糖尿病(T2DM)患者外周血单核巨噬细胞极化的影响及其作用机制。方法 收集T2DM患者及健康体检者外周血,分离单核细胞。将合成的miR-7977抑制物转染至单核细胞中,并用0.1 mg/L脂多糖(LPS)诱导单核细胞向M1型极化。采用流式细胞术检测细胞M1、M2表型变化;采用qPCR检测miR-7977、神经纤维瘤蛋白(NF)2基因以及细胞因子mRNA的相对表达;Western印迹检测NF2蛋白表达。结果 miR-7977在T2DM患者外周血单核细胞中的表达明显高于健康对照组(P<0.01)。miR-7977抑制组细胞中miR-7977的表达较细胞对照组明显降低(P<0.01)。而阴性对照组和细胞对照组miR-7977表达无明显差异(P>0.05)。细胞对照组M1型细胞比例和M1/M2比值明显低于LPS刺激组(P<0.05)。miR-7977抑制组M1型细胞比例和M1/M2比值明显低于LPS刺激组,M2型细胞比例明显高于LPS刺激组(P<0.05)。阴性对照组的M1型和M2型细胞比例及M1/M2比值与LPS刺激组无显著性差异(P>0.05)。miR-7977抑制组IL-4和TGF-β的mRNA表达与LPS刺激组比较明显升高(P<0.05);而TNF-α和iNOS的mRNA表达较LPS刺激组明显降低(P<0.05)。阴性对照组和LPS刺激组的4种细胞因子的mRNA表达无明显差异(P>0.05)。miR-7977抑制组NF2的mRNA和蛋白相对表达量较LPS刺激组织阴性对照组均明显升高(P<0.05)。结论 T2DM患者外周血单核细胞中miR-7977高表达;降低miR-7977表达可以干扰单核细胞向M1型巨噬细胞极化,这一干扰作用与调节NF2基因表达有关。