DNA损伤诱导的非编码RNA在甲状腺乳头状癌上皮间充质转化中的作用

作者：马跃华; 李国庆; 王丽敏; 杨俊朋; 袁慧娟^*

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2019, 33(05): 426-430.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2019.05.003

• 甲状腺乳头状癌
• DNA损伤诱导的非编码RNA
• 上皮间充质转化

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)组织、癌旁正常组织中DNA损伤诱导的非编码RNA(non-coding RNA activated by DNA damage, NORAD)表达差异,及下调TPC-1细胞NORAD表达对上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响。方法取106例PTC患者手术切除PTC组织及癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR法检测NORAD表达,分析NORAD阳性表达与PTC临床病理特征的关系。取对数生长期TPC-1细胞,分为转染组(转染siRNA-NORAD)、阴性对照组(转染siRNA-NC)和空白对照组(不作任何处理),转染后培养48 h,免疫荧光法观察TPC-1细胞形态改变,采用实时荧光定量PCR法检测NORAD表达,采用Transwell法检测TPC-1细胞迁移、侵袭能力,采用Western blot法检测E-cadherin和vimentin表达。结果 PTC组织NORAD mRNA相对表达量(2.73±0.17)高于癌旁正常组织(1.17±0.12)(P<0.05);NORAD阳性表达率在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期(59.68%)、有颈淋巴结转移(59.38%)、有包膜侵犯者(64.86%)高于TNM分期Ⅰ～Ⅱ期(36.36%)、无颈淋巴结转移(35.71%)、无包膜侵犯者(42.03%)(P<0.05);转染后培养48 h,阴性对照组、空白对照组细胞多呈梭形、结构较为松散,转染组细胞呈星形,向四周伸展、排列紧密;转染后培养48 h,转染组NORAD mRNA相对表达量(0.54±0.08)较空白对照组(1.84±0.06)和阴性对照组(1.79±0.07)低(P<0.05),迁移细胞数目[(47.08±7.11)个]、侵袭细胞数目[(23.14±6.23)个]较空白对照组[(94.15±9.42)、(44.68±10.04)个]和阴性对照组[(92.73±10.01)、(52.95±8.09)个]少(P<0.05),vimentin相对表达量(0.21±0.05)低于阴性对照组(0.51±0.06)和空白对照组(0.55±0.07),E-cadherin相对表达量(0.94±0.12)高于阴性对照组(0.34±0.08)、空白对照组(0.31±0.06)(P<0.05),空白对照组各指标与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTC组织NORAD呈高表达,且表达水平与肿瘤恶性程度有关;下调TPC-1细胞NORAD表达可抑制细胞侵袭、迁移,其机制可能与抑制EMT有关。

• 单位
  河南省人民医院; 郑州大学