博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达及纯化

作者：金戈; 张亮; 徐晓艳; 黄荣忠; 马丽华; 邓婧; 李文娟; 房亮; 谢鹏

来源：中国生物制品学杂志, 2011, (10): 1148-1151.

DOI：10.13200/j.cjb.2011.10.33.jing.005

• 博尔纳病病毒
• 磷蛋白类
• 原核细胞
• 基因表达
• 纯化 Borna disease virus(BDV)
• Phosphoproteins
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Purification

目的构建博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白(p24蛋白)基因重组表达质粒,原核表达p24蛋白,并进行纯化。方法通过RT-PCR法从BDV感染的少突胶质细胞株(Oligodendrocyte,OL)中扩增p24基因片段,构建重组表达质粒pET-41a-p24,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达的重组蛋白进行亲和层析纯化。结果经双酶切鉴定和测序证实,重组表达质粒pET-41a-p24构建正确;表达的重组p24蛋白相对分子质量约24 000,表达量占菌体总蛋白的30%以上,主要以可溶形式表达;纯化的重组蛋白纯度达85%左右,可与鼠抗BDV p...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 重庆医科大学