摘要
目的观察微小RNA-142-5p(miR-142-5p)对人前列腺癌细胞LNCaP增殖与侵袭的影响,并探讨其分子机制。方法用Lipofectamine? 3000将miR-142-5p模拟物转染至LNCaP细胞,同时设立对照组。采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测转染后miR-142-5p在细胞中的表达水平。流式细胞术分析细胞周期,噻唑蓝法检测LNCaP细胞的增殖能力,Transwell实验判断LNCaP细胞的侵袭能力。生物信息学预测miR-142-5p的靶基因。双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-142-5p与靶基因的结合。qPCR和免疫印迹法检测转染后靶基因的表达量。结果qPCR检测结果显示,实验组中miR-142-5p的表达量(9.20±0.76)显著高于对照组(1.03±0.13),差异有统计学意义(P<0.01)。LNCaP细胞转染miR-142-5p模拟物后细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.01),细胞的增殖能力明显受到抑制(P<0.05),穿膜细胞数减少了约54.43%(P<0.01)。生物信息学预测miR-142-5p的靶基因为TOP2A。双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-142-5p能够靶向调控TOP2A基因(P<0.01)。miR-142-5p能明显抑制前列腺癌细胞中TOP2A基因的表达(P<0.01)。结论过表达miR-142-5p可以阻滞前列腺癌细胞LNCaP的细胞周期,抑制细胞增殖和侵袭能力。
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单位中国人民解放军陆军军医大学; 重庆市永川区人民医院