核糖体失活蛋白LuffinP1的构建*

作者：王儒鹏; 吴军; 袁军; 解志杰; 贺伟峰; 易绍萱; 张小容

来源：贵阳医学院学报, 2005, (02): 103-107.

DOI：10.19367/j.cnki.1000-2707.2005.02.004

• 免疫毒素类
• Luffin P1
• Westernblot
• 核糖体蛋白质类

目的: 构建免疫毒素LuffinP1的基因原核表达载体,获得免疫毒素LuffinP1,并对其进行鉴定及纯化。方法:设计寡聚核苷酸片段连接延长合成全长LuffinP1, PCR扩增后将其克隆入表达载体pET20b( +)中,经酶切及DNA序列测定鉴定正确,转化表达宿主菌Origami(DE3 )pLysS中,经IPTG诱导表达蛋白LuffinP1,Westernblot鉴定。结果:成功构建了免疫毒素表达载体pET20b( +) -LuffinP1,获得纯化的免疫毒素,并经Westernblot鉴定正确。结论:通过基因工程成功表达免疫毒素LuffinP1,简化了其制备过程,有利于对其进一步研究应用。

• 单位
  创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 西南医院; 中国人民解放军第三军医大学