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摘要
目的 基于RP-HPLC法对扶正补血食疗方中胶原蛋白含量进行测定，并通过正交试验优选出扶正补血食疗方中胶原蛋白的最佳提取方法。方法 于2021年12月至2022年1月将样品以6 mol/L盐酸于110℃水解24 h，利用AQC试剂进行衍生，采用Diamonsil-Cl8色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，以流动相A：无水乙酸钠11.48 g，三乙胺1.72 g,EDTA 1 mg，溶于1 L水中，用磷酸调pH为4.95；流动相B：乙腈水溶液(体积分数60%)，梯度洗脱；柱温37℃；检测波长254 nm；流速1 mL/min；进样量10μL。以羟脯氨酸含量为评价指标，考察煎煮时间、料水比、煎煮温度对胶原蛋白含量的影响，优化其制备工艺。结果 羟脯氨酸在10～500 mg/L浓度范围内线性关系良好(Y=0.036 5X+0.517 3,R2=0.999 1)，平均回收率95.11%，相对标准偏差(RSD)为1.12%(n=6)。猪蹄胶原蛋白的最佳提取工艺为：A3B1C3，即加热温度为100℃，料水比为1∶8，提取时间为3 h。结论 该方法快速准确，稳定可行，可作为扶正补血食疗方中胶原蛋白含量的测定方法，为该产品质量控制及临床应用提供科学依据。
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单位南京中医药大学; 南京市中医院肿瘤科
