阿德福韦酯治疗失败的慢性乙型肝炎患者HBV反转录酶区新变异rtN236V的表型耐药特点分析

作者：王晓; 刘妍; 思兰兰; 陈丽; 白文林; 刘立明; 王嫣; 许智慧; 戴久增; 姚增涛; 徐东平

来源：Y201304001, 2013, (04): 256-259.

• 肝炎病毒
• 乙型
• 变异
• 抗药性
• 病毒 hepatitis B virus
• variation
• drug resistance
• viral

目的鉴定1例阿德福韦酯(ADV)治疗失败的慢性乙型肝炎患者HBV反转录酶(RT)区的新变异rtN236V,并分析其表型耐药特点。方法从1例ADV治疗失败患者的血清中提取HBV DNA,采用巢式PCR扩增HBV RT区,将PCR产物克隆到pGEM-Teasy载体,转化JM109细胞。挑选34个阳性克隆进行DNA测序并分析耐药相关突变。构建1.1倍HBV野生株和耐药株重组载体,转染人肝癌细胞系HepG2细胞。转染4h后分别加入不同浓度的拉米夫定(LAM)、ADV、恩替卡韦(ETV)和替诺福韦(TDF),转染后第4天收集细胞培养液,采用实时荧光定量PCR法检测不同药物浓度作用下细胞培养上清中HBV ...

• 单位
  解放军第302医院; 桂林医学院