沉默信息调节因子1对急性心肌梗死小鼠的作用研究

作者：陈亚芬; 陈媛媛; 吴丽苹; 薛琪琪; 杨克; 陆林; 曹久妹^*

来源：诊断学理论与实践, 2018, 17(06): 670-675.

DOI：10.16150/j.1671-2870.2018.06.009

• 沉默信息调节因子1
• 白藜芦醇
• 梗死
• 急性心梗

目的 :探讨沉默信息调节因子1 (Sirtuin1,Sirt1)对急性心肌梗死(简称心梗)小鼠的作用及其机制。方法 :通过结扎小鼠心脏冠状动脉左前降支构建急性心梗小鼠模型,并于心梗后不同时间(1、3、5、7 d)收集梗死区及梗周区域组织(以假手术组心肌组织为对照),利用实时定量PCR检测Sirt1表达情况。另构建小鼠心梗模型,在心梗手术结扎成功的同时,用微量注射针在心梗组织周围注射Sirt1过表达慢病毒(以阴性对照慢病毒点注射组为对照),于术后7 d通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法检测心梗面积。体外培养小鼠原代心肌细胞,并于缺氧(2%O2)条件下,使用不同浓度(25、50及100μmol/L)白藜芦醇刺激小鼠原代心肌细胞,采用蛋白印迹法检测Sirt1和半胱氨酸蛋白酶3剪切体的表达水平,利用细胞凋亡检测试剂(TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果:发现在梗死后1～7 d中,梗死区及梗周区组织中的Sirt1 mRNA表达水平呈显著下降趋势(P<0.05)。同时,相较于阴性对照慢病毒注射组,Sirt1过表达慢病毒注射组可显著性减小梗死面积[(15.68±3.28)%比(29.50±5.56)%,P<0.05]。随着白藜芦醇刺激浓度的增加,Sirt1蛋白表达水平呈剂量依赖型升高,而半胱氨酸蛋白酶3剪切体蛋白表达水平呈下降趋势;心肌细胞的凋亡也随刺激浓度的增加逐渐减少。结论:Sirt1在急性心梗组织中表达下降,过表达Sirt1可减少急性心梗后的心梗面积。

• 单位
  上海交通大学医学院附属瑞金医院