橙皮素抑制膀胱肿瘤细胞T24增殖及其机制研究

作者：曹智修; 袁敬东; 章传华; 周高峰; 黄遂斌; 白涛; 吕磊; 黄韬

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(12).

• 膀胱肿瘤
• 橙皮素
• 机制

目的探讨橙皮素对膀胱肿瘤细胞T24细胞株生长繁殖的影响, 探讨橙皮素的相关作用机制。方法体外培养购自美国模式培养无集存库人膀胱肿瘤T24细胞株, 将2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0 μmol/L橙皮素分别作用于T24细胞株24、48、72 h并通过噻唑蓝(MTT)法观察细胞生长和增殖状况;通过流式细胞仪检测细胞生长G0期与G1比值百分比的变化;并通过Transwell实验观察橙皮素对T24细胞迁移和侵袭的影响;蛋白质印迹法(Western blot)观察磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、细胞外信号调节激酶(ERK) 、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达及与内参甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)比值的变化。两组之间的比较使用独立样本t检验, 多组间比较使用单因素方差分析。结果橙皮素可明显抑制T24细胞株的增殖, 且经橙皮素处理24 h组的半抑制浓度(IC50)[(20.79±1.82) μmol/L]与处理48 h组的IC50[(21.34±1.64) μmol/L]相当, 两者差异无统计学意义(t=0.562, P>0.05), 而两组高于72 h组(10.28±1.16) μmol/L, 有统计学意义(t=10.498、11.060, P<0.05);10、20 μmol/L组作用48 h后细胞周期G0/G1百分比分别为(70.12±5.21)%、(78.46±7.43)%, 高于对照组[(57.86±5.39)%], 差异有统计学意义(t=12.260、20.600, P<0.05);10 、20 μmol/L组作用48 h后侵袭抑制率分别为(25.37±1.76)%、(41.31±1.86)%, 迁移的抑制率分别为(21.23±1.09)%、(34.67±1.58)%, 高于对照组侵袭抑制率[(0.21±0.02)%]和迁移抑制率[(0.27±0.03)%], 差异有统计学意义(t=25.170、41.110;t=21.030、34.470, P<0.05);10 、20 μmol/L组作用48 h后p-ERK、PI3K、p-Akt、N-Cadherin蛋白表达降低, 与内参的比值分别为(0.46±0.06、0.44±0.06;0.54±0.08、0.51±0.09;0.48±0.06、0.47±0.07;0.50±0.05、0.49±0.05)比对照组与内参比值(0.67±0.06、0.82±0.11、0.71±0.04、0.78±0.10)低, 差异有统计学意义(t=4.205、4.283、4.231、5.278;t=4.231、4.310、4.240、5.281, P<0.05), E-Cadherin蛋白表达升高, 与内参的比值分别为(0.73±0.14、0.74±0.20)比对照组与内参比值(0.56±0.08)高, 差异有统计学意义(t=7.181、7.183, P<0.05)。结论橙皮素对膀胱癌T24细胞株生长有抑制作用, 其机制可能与PI3K/Akt和RAS/MAPK信号通路有关。

• 单位
  武汉市第一医院