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摘要
目的研究肝硬化患者骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外扩增方法及其生长特性和特异性表面标记,为肝组织工程“种子细胞”的选择提供新的理论依据,为进一步研究自体骨髓间充质干细胞移植治疗肝衰竭时移植细胞在体内的调控机制打下基础。方法无菌抽取4例肝硬化志愿者骨髓3~4 mL,年龄30~40岁,利用密度梯度离心法联合贴壁筛选法逐步筛选MSCs,获取MSCs,倒置显微镜下逐日观察细胞生长特性,细胞计数,绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞表面标志CD44、CD45。结果原代培养细胞生长潜伏期0~9 d,对数增殖期为10~19d,生长平台期为20~24 d;传代细胞生长周期较原代细胞快,细胞生长潜伏期为4~24 h,对数增殖期为3~12 d,13~15 d进入生长平台期。肝硬化患者骨髓MSCs高表达CD44,低表达CD45。结论肝硬化患者骨髓MSCs体外生长良好,性质稳定,可以作为“种子细胞”用于自体骨髓干细胞移植和生物人工肝系统。
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