Nrf2抑制剂4f诱导白血病细胞凋亡中miRNA-4298/PADI4信号轴的作用研究

作者：赵守臻; 隋丽华; 丁慧; 吴沄桦; 李庆; 孙晓琳; 王欢; 王朝喆; 孙瑞婧; 毕可红^*; 姜国胜^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2023, 43(09).

• 白血病细胞
• 凋亡
• PADI4
• miRNA-4298
• P53
• Nrf2抑制剂4f

目的探讨miRNA-4298靶向PADI4调控P53在介导核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2, Nrf2)抑制剂4f诱导白血病细胞凋亡中的关键作用。方法细胞生长密度和CCK-8计数法检测白血病细胞增殖水平;荧光定量qRT-PCR法检测细胞株中PADI4和P53基因的表达水平;流式细胞术检测白血病细胞的周期百分率和凋亡率;Western blot法检测PADI4、P53、Bcl-2、Bax、caspase-3和caspase-9的蛋白质表达水平;二代测序检测miRNA和mRNA的基因表达水平;TargetScan数据库进行靶向预测PADI4上游的miRNA和下游关联基因;荧光素酶试验检测miRNA-4298靶向结合的PADI4 3′UTR及其活性调控作用。细胞转染试验检测siRNA、PADI4载体、miRNA mimics和miRNA inhibitor的干扰或拯救作用。结果 Nrf2抑制剂4f具有明显抑制THP-1、K562和U937细胞增殖水平以及诱导其凋亡的作用。4f主要通过miRNA-4298的靶向海绵作用降低PADI4表达水平, 继而抑制白血病细胞增殖并诱导其凋亡。进一步研究发现, 上述作用与PADI4表达水平降低后的下游P53表达水平升高有关。miRNA-4298/PADI4靶向诱导P53的表达水平升高, 导致下游Bcl-2蛋白表达降低和Bax蛋白表达升高。Bcl-2/Bax比值的倒置继而激活caspase-3和caspase-9蛋白, 导致白血病细胞发生凋亡现象。结论 miRNA-4298/PADI4/P53信号轴是介导4f靶向诱导白血病细胞凋亡的重要机制途径, 也是靶向干预的新型信号通路。

• 单位
  山东大学; 淄博市第一医院; 潍坊医学院; 滨州医学院; 山东省千佛山医院