红曲菌MpigE基因过表达质粒的构建

作者：郑学海; 柳燕; 朱锦懋; 杨成龙; 陈由强^*; 陈建楠^*

来源：福建农业科技, 2020, (05): 1-11.

DOI：10.13651/j.cnki.fjnykj.2020.05.001

• 红曲菌
• MpigE基因
• 质粒
• 过表达
• 构建

以福建红曲菌M-CL为出发菌株,以PSKH质粒为模板克隆PtrpC启动子及TrpC终止子。通过重叠延伸PCR技术融合PtrpC启动子、MpigE (目的)基因、TrpC终止子,获得PMT融合片段。为了验证融合片段PMT的正确性,进行琼脂糖凝胶电泳分析,在2 100bp左右出现单一且清晰的条带。通过EcoR V和SpeI酶切PMT片段,插入带有潮霉素抗性的PSKH质粒的EcoR V和Spe I位点,构建1个红曲菌过表达载体HPMT,大小为7 155bp。通过构建过表达载体,以期对红曲菌M-CL进行改造,获得高产色素低产桔霉素的菌株。

• 单位
  福建省农业科学院; 生命科学学院; 福建师范大学