H7亚型禽流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

作者：包红梅; 赵玉辉; 李一经; 王秀荣; 陈化兰

来源：中国兽医科学, 2013, (12): 1224-1230.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.12.002

• H7亚型禽流感病毒
• 反转录环介导恒等温扩增
• 快速检测 H7subtype avian influenza virus
• reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification(RT-LAMP)
• rapid detection

根据GenBank中登录的H7亚型禽流感病毒(H7AIV)血凝素基因序列,设计了一套特异识别HA基因序列中6个不同区段的环介导恒等温扩增(LAMP)引物,并以此套引物建立了一种基于反转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)技术的H7亚型禽流感病毒诊断方法。结果显示,该方法对H7AIV RNA的最小检测限为0.1pg,灵敏度高于普通一步法RT-PCR 100倍;全部反应可在1.5h内完成;在反应体系中添加Fluorescent Detection Reagent染料后,可通过肉眼观察有无荧光直接判定结果。灵敏性及特异性试验证明,该方法灵敏度高、特异性好,能够作为H7亚型禽流感病毒的快速诊断方法。

• 单位
  东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 农业部