摘要

为探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对神经细胞毒性的作用机理,本试验选用仔猪海马神经细胞为研究对象,体外培养至对数生长期后,分别用含0(空白)、250、500、1 000 ng/mL DON和1 000 ng/mL DON+20μmol/L半胱天冬酶(Caspase)-8抑制剂(FM K)的培养液进行染毒培养。培养24 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(ROS)水平以及线粒体膜电位变化;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞凋亡线粒体途径中主要凋亡基因B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)、Caspase-2、Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达量。结果显示:1)与空白组相比,250、500、1 000 ng/mL DON组的细胞凋亡率显著或极显著升高(P <0. 05或P <0. 01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FM K组的细胞凋亡率极显著降低(P <0. 01)。2)与空白组相比,250、500、1 000 ng/mL DON组的ROS水平极显著升高(P <0. 01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FM K组的ROS水平极显著降低(P <0. 01)。3)与空白组相比,250、500、1 000 ng/mL DON组的线粒体膜电位极显著降低(P <0. 01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FM K组的线粒体膜电位极显著升高(P <0. 01)。4)与空白组相比,500、1 000 ng/mL DON组的Bax、Bid、Caspase-2、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达量极显著降低(P<0.01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FM K组的Bax、Bid、Caspase-2、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达量极显著降低(P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达量极显著升高(P<0.01)。结果表明,DON可通过线粒体通路诱导仔猪海马神经细胞凋亡。