摘要
目的:明确Zn2+交联的海藻酸钠水凝胶(AH)三维支架的理化特性、超微结构、管道结构的稳定性;评价AH与脊髓神经干/祖细胞(NSPCs)的生物相容性。方法:采用Zn2+与海藻酸钠交联制备AH三维支架;光镜和扫描电镜评估其微管道结构;光谱分析仪测定盐酸洗涤后水凝胶内部残留Zn2+含量;分离和培养胎鼠(E14)脊髓NSPCs;细胞培养环境下用磷酸盐缓冲液孵育AH三维支架18周,光镜下观察内部管道变化情况,测量重量变化;脊髓NSPCs与AH三维支架共培养,MTT法测定细胞存活率,免疫荧光染色检测NSPCs的分化。结果:AH三维支架管道直径为(93.26±6.24)μm,管道密度为(9.72±2.37)/mm2,管道孔隙率为(66.22±8.97)%;经过盐酸洗涤8次后,AH三维支架内Zn2+浓度为0.08 nmoL/mg;脊髓NSPCs在AH三维支架表面的存活率>90%,且可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论:AH三维支架仅含有极低浓度的Zn2+,且具有稳定的拓扑结构,与脊髓NSPCs有良好的生物相容性。
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单位华中科技大学同济医学院; 同济医院