一种人硫氧还蛋白基因修饰肝细胞的制备

作者:李华; 汪根树; 张剑; 姜楠; 贾昌昌; 杨扬; 陈规划
来源:中山大学学报(医学科学版), 2010, (04): 572-576.
DOI:10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2010.0092

摘要

【目的】制备出一种人硫氧还蛋白(hTrx)基因修饰的肝细胞。【方法】逆转录聚合酶链反应法扩增出hTrxcDNA,应用重组逆转录病毒制备hTrx基因修饰大鼠肝细胞。白蛋白免疫组化SABC法进行肝细胞活性鉴定,MTT比色试验进行抗氧化应激能力检测。【结果】克隆出hTrx开放阅读框cDNA并制备出重组逆转录病毒,感染真核细胞后可分泌融合表达的hTrx并具有生物学活性。制备出hTrx基因修饰大鼠肝细胞,免疫组化SABC法显示肝细胞功能正常,MTT比色法检测具有较强的抗氧化应激能力(P<0.05),并可有效增殖。【结论】成功制备出一种具有较强抗氧化应激的hTrx基因修饰肝细胞。

全文