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摘要
目的通过研究黄芪总皂苷、黄芪总多糖、黄芪总黄酮对TGF-β1损伤睾丸Leydig细胞增殖和活性的影响,探究黄芪主要成分中对睾丸Leydig细胞保护具有先导性化合物地位的成分。方法体外培养睾丸Leydig细胞,将培养的细胞分为3组:正常对照组、模型组、实验组。正常对照组加入RPMI1640完全培养基2 mL;模型组加入含5 ng/mL TGF-β1及与中药等体积PBS的RPMI1640完全培养基2 mL;实验组分别加入黄芪总皂苷终浓度20、100μg/mL,黄芪总多糖终浓度10、50μg/mL,黄芪总黄酮终浓度10、50μg/mL的含有5 ng/mL TGF-β1的RPMI1640完全培养基2 mL。48 h后进行细胞爬片和ELISA法检测T、E2、P450aromd蛋白含量,显微镜观察细胞爬片,用SPSS 20.0、GraphPad Prism 6.0软件对数据进行统计分析。结果 TGF-β1能使Leydig细胞形态异常,数量减少,明显抑制Leydig细胞合成T、E2、P450aromd,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。黄芪总皂苷、黄芪总多糖、黄芪总黄酮都均能改善睾丸Leydig细胞病变,促进Leydig细胞的增殖,并且存在一定的量效关系。三成分都能提高TGF-β1损伤的睾丸Leydig细胞的活性,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),单因素分析,终浓度10μg/mL的黄芪总黄酮缓解TGF-β1抑制睾丸Leydig细胞合成T的效果最显著;终浓度20μg/mL的黄芪总皂苷缓解TGF-β1抑制睾丸Leydig细胞合成E2的效果最显著;终浓度50μg/mL的黄芪总黄酮缓解TGF-β1抑制睾丸Leydig细胞合成P450arom的效果最显著。三者与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析,终浓度50μg/mL的黄芪总黄酮缓解缓解TGF-β1抑制Leydig细胞合成T、E2、P450aromd的效果最显著。结论黄芪总黄酮对睾丸Leydig细胞保护具有先导性化合物的地位。
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