犊牛睾丸支持细胞分离培养与纯度鉴定

作者：王雪; 王子铭; 李晓宇; 冯瑞; 张贵学^*

来源：黑龙江动物繁殖, 2020, 28(06): 1-6.

DOI：10.19848/j.cnki.ISSN1005-2739.2020.09.2901

• 犊牛
• 支持细胞
• 原代培养
• 纯度
• 鉴定

为了优化现有的犊牛(新生7 d内)睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)分离纯化方法,并建立一种简单、快捷地获得高纯度SCs的原代培养方法,试验采用两步酶(1.0 mg/m L胶原酶Ⅳ、2.5 mg/m L胰蛋白酶)消化法和差速贴壁法分离纯化SCs。在显微镜下观察经HE染色后SCs的形态学特征及生长增殖情况。再经RT-PCR方法检测SCs标志基因的表达,以及采用免疫荧光方法检测SCs标志蛋白(WT1和Vimentin)的表达,并对SCs进行纯度鉴定。结果表明:通过优化分离培养的犊牛睾丸SCs纯度较高,能完全除去间质细胞和大部分类肌细胞。说明该优化方法可有效地分离犊牛睾丸SCs并可在体外长时间培养。

• 单位
  黑龙江八一农垦大学; 动物科技学院; 东北农业大学