RNAi靶向沉默FLIP基因促进TRAIL诱导卵巢癌A2780细胞凋亡

作者：王毓; 刘培淑; 张小磊; 代彩凤; 王岸聪; 李娟

来源：基础医学与临床, 2009, (03): 268-272.

• RNA干扰
• 双链RNA
• 基因,FLIP
• TRAIL
• 卵巢肿瘤

目的探讨RNAi靶向沉默FLIP基因对TRAIL诱导卵巢癌细胞凋亡的影响。方法设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA,在脂质体(LipofectamineTM2000)介导下转染人卵巢癌细胞株A2780。采用半定量RT-PCR和Western blot法检测FLIP-siRNAs转染前后A2780细胞FLIPmRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用最强的FLIP-siRNA。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测FLIP-siRNA转染前后TRAIL对A2780细胞生长抑制作用的变化。以Annexin-V-PI双染法流式细胞术(FCM)比较FLIP-siRNA转染前后TRAIL诱导的细胞凋亡的情况。结果特异性FLIP-siRNA片段能有效降低A2780细胞中FLIPmRNA和蛋白水平(P<0.01),并具有时间依赖性;转染FLIP-siRNA后,TRAIL对A2780细胞的生长抑制作用明显增强(P<0.05),TRAIL诱导的细胞凋亡也显著增加(P<0.05)。结论靶向FLIP基因的siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP表达,并可增加细胞对TRAIL的敏感性。

• 单位
  山东大学齐鲁医院