黄芩苷通过TREM2/TLR4/NF-κB信号通路抑制脂多糖/干扰素γ诱导的BV2细胞炎症反应

作者：贺春香; 于文静; 杨苗; 李泽; 夏小芳; 李平; 成绍武; 宋祯彦

来源：中国中药杂志, 2022, 47(06): 1603-1610.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20211103.401

• 小胶质细胞
• 黄芩苷
• TREM2
• TLR4
• NF-κB
• 炎症反应

基于2型髓样细胞触发受体（triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2）/Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）/核因子κB（nuclear factor kappaB,NF-κB）信号通路，探讨黄芩苷对脂多糖（LPS）/干扰素γ（IFN-γ）诱导的小胶质细胞炎性活化的作用机制。通过LPS联合IFN-γ干预构建小鼠小胶质细胞（BV2）炎性活化模型，分为正常组、模型组、黄芩苷低剂量组(5μmol·L-1)、黄芩苷中剂量组(10μmol·L-1)、黄芩苷高剂量组(20μmol·L-1)和米诺环素组(10μmol·L-1)。CCK-8检测细胞存活率；明场下观察细胞形态；实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qPCR）法检测白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）和精氨酸酶-1（arginase-1,Arg-1）mRNA表达；Western blot法检测肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-1β、TREM2、TLR4、核因子抑制蛋白（inhibitor kappaB alpha, IκBα）、p-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达水平；细胞免疫荧光检测NF-κB p65的入核情况。与空白组比较，模型组BV2细胞大多数趋向于促炎症的M1阿米巴形态，IL-1β、IL-6和iNOS mRNA水平显著升高，IL-4、IL-10和Arg-1 mRNA水平显著降低（P<0.01）,TNF-α、IL-1β、TLR4、p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达均明显升高（P<0.01）,TREM2蛋白表达水平下降，核内NF-κB p65表达升高；与模型组比较，黄芩苷和米诺环素干预各组BV2细胞形态呈现不同程度的恢复，IL-1β、IL-6和iNOS mRNA水平均明显降低，IL-4、IL-10和Arg-1 mRNA水平升高（P<0.01）,TNF-α、IL-1β、TLR4、p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达均明显降低（P<0.05）,TREM2蛋白表达水平升高，核内NF-κB p65的表达降低。以上结果表明，黄芩苷可以通过调节小胶质细胞TREM2-TLR4之间的失衡，抑制下游NF-κB激活，从而促进小胶质细胞从促炎表型向抗炎表型的极化。

• 单位
  湖南中医药大学