摘要
目的:构建Hif-1α基因(野生型、点突变型)慢病毒真核表达载体,并研究其对兔BMSCs(骨髓间充质干细胞)成骨基因表达的影响。方法:根据野生型人源Hif-1α基因序列和确定酶切位点的点突变型序列及质粒抽提、PCR等制备Hif-1α基因(野生型、点突变型)慢病毒液;转染兔BMSCs后通过免疫荧光显微镜及qPCR定量分析等检测被转染细胞目的基因Hif-1α和BMP-2的表达。结果:免疫荧光显微镜下可见,转染7d后野生型组和点突变组细胞均未见明显荧光,转染14d后两组细胞均呈现较明显的绿色荧光;qPCR定量结果显示,转染7d后即有Hif-1α和BMP-2基因的显著表达并在转染14d后仍然显示较高表...
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单位同济大学附属东方医院