胞内劳森菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

作者：白挨泉; 郭建超; 覃宗华; 蒲文珺; 马春全; 李国清; 张浩吉

来源：畜牧兽医学报, 2014, 45(10): 1733-1738.

• 猪胞内劳森菌
• TaqMan荧光定量PCR
• 检测

为建立猪胞内劳森菌的TaqMan荧光定量PCR检测方法,针对胞内劳森菌的16SrDNA基因设计合成特异性的引物和TaqMan探针,经过优化各项反应条件,建立了TaqMan荧光定量PCR检测方法。该方法仅对胞内劳森菌靶基因有信号,其相关性方程为Ct=-3.318×log(conc)+38.840(R2=0.998),具有良好的线性关系,对标准质粒最低检出量为5.55copies·μL-1,组内样品的变异系数低于2%。表明该TaqMan荧光定量PCR方法的特异性强、敏感度高、重复性好,具有较好的实用性,能准确定量DNA样品中靶基因的拷贝数,适合于对临床样品中胞内劳森菌定性、定量检测和防治效果的评价。

• 单位
  佛山科学技术学院; 华南农业大学; 广州英赛特生物技术有限公司