高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞的影响研究

作者：邵珺; 胡迪; 田一焜

来源：眼科新进展, 2022, 42(03): 184-188.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2022.0037

• 人视网膜内皮细胞
• miR-615-5p
• 血管内皮生长因子A

目的 探讨高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞(hRECs)迁移能力、成管能力、愈合能力的影响及其机制。方法 取对数生长期的hRECs,将细胞分为低糖(LG)组、高糖(HG)组、miR-615-5p模拟物(mimic)组、miR-615-5p模拟物阴性对照(mi-nc)组、miR-615-5p抑制剂(inhibitor)组、miR-615-5p抑制剂阴性对照(in-nc)组。LG组hRECs用含5.5 mmol·L~(-1)葡萄糖的培养基培养，其余各组hRECs均用含25.0 mmol·L~(-1)葡萄糖的培养基培养。qRT-PCR分析LG组与HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达情况；Transwell实验、成管实验、划痕愈合实验分析各组hRECs的细胞迁移能力、成管能力和愈合能力；免疫荧光实验分析miR-615-5p对hRECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)表达量的影响。结果 与LG组(1.00±0.28)相比，HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达水平(6.36±1.31)上升(t=12.69,P<0.01)。Transwell实验中，HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组的hRECs相对细胞迁移数分别为0.99±0.12、0.96±0.08、0.50±0.07、0.72±0.13和0.96±0.10,与mi-nc组相比，mimic组中hRECs的迁移能力显著增强(t=6.10,P<0.05);与in-nc组相比，inhibitor组中hRECs的迁移能力显著降低(t=7.21,P<0.05)。成管实验结果显示，HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的相对成管管长分别为1.00±0.15、1.24±0.13、0.81±0.13、0.40±0.05和0.86±0.04;与mi-nc组相比，mimic组hRECs的成管能力显著增强(t=5.52,P<0.01);相较于in-nc组，inhibitor组hRECs的成管能力显著降低(t=17.80,P<0.01)。划痕愈合实验显示，HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的创面愈合率分别为0.71±0.01、1.00±0.01、0.64±0.02、0.56±0.05和0.54±0.04,相较于mi-nc组，mimic...

• 单位
  江南大学; 生物工程学院; 南京医科大学; 无锡人民医院