摘要
目的 比较两类凝血酶受体活化过程中蛋白激酶C(PKC)与钙离子(Ca2+)对血小板聚集率以及血小板膜表面活化标志物糖蛋白(GP)Ⅰ b表达的影响,探讨G蛋白q(Gq)信号途径在凝血酶受体活化过程中的作用.方法 分别以凝血酶受体活化肽PAR1-AP(SFLLRN)与PAR4-AP(AYPGKF)模拟各自的固定配基活化血小板.观测PKC选择性抑制剂Ro-31-2220与胞内Ca2+螯合剂(BAPTA/AM)作用过程中血小板聚集与血小板膜表面GP Ⅰ b的改变.结果 两类凝血酶受体活化肽均能诱导血小板活化,产生完全的聚集波,血小板膜GP Ⅰ b则呈现进行性减少后逐渐回升的可逆性变化.BAPTA与Ro-31-2220预处理后蛋白激酶活化受体(PAR)肽诱导的血小板聚集被抑制,但形态变化依然存在.Ro-31-2220明显抑制PAR1-AP引起的GP Ⅰ bα内陷[1 min时为(87.0±0.04)%,2 min时为(73.00±0.08)%,P《0.05];PAR4-AP可以延长GP Ⅰ bα在胞内的逗留,减缓其返回血小板表面的进程[10 min时为(44.00±0.01)%,30 min时为(46.00±0.05)%,P《O.05].BAPTA则能明显抑制两类PAR肽引起的GP Ⅰ bα内陷[1 min时分别为(94.00±0.08)%和(95.00±0)%,2 min时分别为(92.00±0.02)%和(94.00±0.01)%,5 min时分别为(91.00±0.02)%和(91.00±0.02)%,10 min时分别为(90.00±0.04)%和(87.00±0.03)%,各时间点之间比较P值均《0.05].结论 PKC与Ca2+在凝血酶受体活化中发挥重要作用.Ca2+与凝血酶受体活化过程密切相关,对两类受体作用相似.PKc在PAR1途径促使GP Ⅰ b内陷,在PAR4途径则加速GP Ⅰ b重返膜表面.
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单位苏州大学附属第一医院