紫花前胡苷调控EMT对宫颈癌细胞侵袭迁移的作用机制

作者：任璐; 曹芹雪; 杨少琴

来源：解放军医学杂志, 2022, 1-12.

• 紫花前胡苷
• 宫颈癌
• 侵袭
• 细胞迁移
• 上皮-间充质转化
• miR-324-3P/WNT3a轴

目的　探讨紫花前胡苷(NDK)通过调控上皮-间质转化(EMT)影响宫颈癌细胞侵袭迁移的可能分子机制，并分析其对微小核糖核酸(miR)-324-3P/WNT3a轴的影响。方法　取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞，将HeLa细胞分为4组：空白组(于37 ℃、5%CO_(2)饱和湿度培养箱中培养)、miR-324-3P inhibitor组(hsa-miR-324-3p inhibitor转染)、miR-324-3P inhibitor+NDK组(转染miR-324-3P inhibitor后加入20 mmol/L浓度的NDK培养)、NDK组(加入20 mmol/L浓度的NDK培养)，均处理48 h。采用Transwell实验检测各组细胞侵袭能力；细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力；qRT-PCR检测各组细胞中miR-324-3P、WNT3a水平；Western blotting检测各组细胞中EMT相关标志蛋白E-钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、WNT3a、β-catenin蛋白表达；双荧光素酶报告基因检测miR-324-3P与WNT3a基因的靶向关系。结果　与空白组比较，miR-324-3P inhibitor组HeLa细胞的穿膜细胞数增多，划痕愈合率增高，miR-324-3P mRNA表达水平下降，WNT3a mRNA表达水平升高，E-cadherin蛋白相对表达量降低，波形蛋白、N-cadherin、WNT3a和β-catenin蛋白相对表达量升高(P<0.05)；而miR-324-3P inhibitor+NDK组、NDK组HeLa细胞的穿膜细胞数减少，划痕愈合率降低，miR-324-3P mRNA表达水平升高，WNT3a mRNA表达水平降低，E-cadherin蛋白相对表达量升高，波形蛋白、N-cadherin、WNT3a和β-catenin蛋白相对表达量降低(P<0.05)；且miR-324-3P inhibitor+NDK组上述各指标均低于NDK组。双荧光素酶报告基因结果显示，miR-324-3P mimic可降低WNT3a WT荧光素酶活性(P<0.05)，但不影响WNT3a mut荧光素酶活性(P>0.05)。结论　紫花前胡苷可通过调控EMT抑制宫颈癌细胞的侵袭迁移，其作用机制可能与调节miR-324-3P/WNT3a轴有关。

• 单位
  河南大学淮河医院