TGM2对甲状腺癌干细胞紫杉醇化疗敏感性的影响及作用机制

作者：林琳; 王承芳; **军^*

来源：中国免疫学杂志, 2020, 36(13): 1594-1599.

• 谷氨酰胺转胺酶2
• 甲状腺癌
• 肿瘤干细胞
• 紫杉醇
• 化疗敏感性

目的:探究转谷氨酰胺酶2(TGM2)对甲状腺癌干细胞(TCSC)紫杉醇化疗敏感性的影响及作用机制。方法:收集甲状腺癌患者新鲜肿瘤组织,分离培养原代甲状腺癌细胞,经无血清培养成悬浮肿瘤细胞球时,流式细胞仪筛选出CD133+表型的TCSC进行后续实验。Western blot检测TCSC中干性基因Nanog、Sox2蛋白表达水平。小干扰RNA技术转染TCSC,分为si-TGM2组和si-NC组,MTS检测TGM2 siRNA转染的TCSC对紫杉醇的敏感性;qRT-PCR法检测紫杉醇处理TCSC后细胞TGM2 mRNA表达。软琼脂克隆实验检测TGM2 siRNA转染对紫杉醇处理的TCSC肿瘤球形成能力的影响;Tunnel凋亡和流式细胞仪检测TGM2 siRNA转染对紫杉醇处理的TCSC凋亡的影响。裸鼠实验检测TGM2对紫杉醇处理TCSC敏感性的影响。Western blot检测TGM2 siRNA转染对紫杉醇处理的TCSC凋亡蛋白caspase-3、Bcl-2表达的影响。结果:流式细胞仪分选出CD133+细胞占全部细胞的1.21%,CD133+细胞中Nanog、Sox2蛋白表达水平显著高于CD133-细胞;沉默TGM2表达可显著提高TCSC对紫杉醇的敏感性;紫杉醇处理的TCSC中TGM2 mRNA表达水平显著高于未经紫杉醇处理的TCSC;沉默TGM2表达显著抑制紫杉醇处理的TCSC肿瘤球形成能力,显著增加紫杉醇处理的TCSC凋亡,提高TCSC对紫杉醇的敏感性,提高紫杉醇处理的TCSC凋亡蛋白caspase-3、Bax表达(P<0.05)。结论:TGM2基因可能通过抑制凋亡信号通路,降低TCSC的紫杉醇化疗敏感性。

• 单位
  大连医科大学附属第一医院