葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因诊断方法的建立

作者：吴彤华; 朱元昌; 陈春媚; 蔡靖; 林奇; 张晓庆; 曾勇; 尹彪

来源：临床检验杂志, 2014, 32(03): 188-192.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2014.03.08

• 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
• 基因突变
• 单管多重聚合酶链反应
• 多重SNaPshot技术
• 基因诊断

目的建立有效可行的高通量葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)基因诊断新技术。方法建立单管三重PCR扩增G6PD基因外显子213目的片段,构建双管25重SNaPshot反应体系检测25个已报道的中国人群的G6PD基因突变位点。用20份已知基因型的样品进行重复性试验。对60例未知样品同时用多重SNaPshot基因分型技术和DNA测序法进行双盲试验。结果建立的多重SNaPshot技术可同时检测25个G6PD基因突变位点,且可区分正常、女性杂合子与男性半合子/女性纯合子,有效检出复合突变。批内及批间的重复性均达到100%。60例未知样本检出23例突变,SNaPshot基因分型结果与测序结果完全一致,特异性和准确性均为100%。结论建立的单管三重PCR结合双管25重SNaPshot技术是一种有效可行的G6PD缺乏症基因诊断的新方法。

• 单位
  深圳中山生殖与遗传研究所; 深圳中山泌尿外科医院