基于CRISPR/Cas系统的病原核酸检测技术研究进展

作者：李红招; 王浩; 尹睿; 乐敏; 李艳^*

来源：浙江大学学报(农业与生命科学版), 2023, 49(05): 618-632.

• CRISPR/Cas系统
• Cas蛋白
• 病原
• 核酸
• 检测方法

作为一种古老的细菌和古菌免疫系统，规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白[clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated protein (Cas), CRISPR/Cas]系统现已发展为新兴的热门基因编辑工具，极大地推动了其他多个生物学相关领域的发展。其中，通过结合CRISPR/Cas系统与核酸恒温扩增技术建立了一些新型的高效、灵敏、不依赖仪器设备的检测方法，如DNA内切酶靶向的CRISPR反式报告系统（DNA endonuclease-targeted CRISPR trans-reporter, DETECTR）、特异性高灵敏度的酶报告器系统（specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking, SHERLOCK）等，不但提高了CRISPR/Cas系统在不同应用场景下的检测性能，更进一步激发了其在现场检测中的应用潜力。本文基于近年来被广泛应用的3种CRISPR/Cas系统（CRISPR/Cas9、CRISPR/Cas12a以及CRISPR/Cas13）的生物核酸检测方法，阐述了CRISPR/Cas系统的生物学意义及一般作用原理，并通过回顾以往开展的CRISPR/Cas系统相关的病原检测研究，比较分析了不同检测系统的特点以及在实际应用过程中可能存在的不足，为针对不同病原在不同应用场景下建立更加高效、合理的CRISPR/Cas系统检测方法提供了有益参考。

• 单位
  浙江大学; 动物科学学院