柔嫩艾美耳球虫gam22基因重组质粒的免疫原性及保护效果

作者：董青; 王京森; 李新; 王晓岑; 李建华^*

来源：中国兽医杂志, 2021, 57(09): 6-11.

• 柔嫩艾美耳球虫
• Etgam22
• 甲病毒复制子载体
• 抗球虫指数
• 免疫原性
• 保护效果

为了评价重组质粒pSMART2b-Etgam22抗柔嫩艾美耳球虫的保护效果,本试验用PCR扩增获得Etgam22基因后连接至pSMART2b载体以构建重组质粒pSMART2b-Etgam22,用Western Blot分析重组质粒pSMART2b-Etgam22在293T细胞中的表达情况,用重组质粒pSMART2b-Etgam22免疫雏鸡,并检测抗体水平和细胞因子分泌情况,随后用柔嫩艾美耳球虫卵囊感染免疫的雏鸡,观察死亡情况,检测体重变化、卵囊数量、盲肠病变,通过抗球虫指数评价pSMART2b-Etgam22对柔嫩艾美耳球虫感染的保护效果。结果显示,本试验成功构建了重组质粒pSMART2b-Etgam22;Western Blot分析表明,该重组质粒可在细胞中表达融合蛋白,表达蛋白可被抗柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别。与未免疫感染组相比,pSMART2b-Etgam22免疫雏鸡显著提升了抗体水平(P<0.01)及IL-2和IFN-γ分泌(P<0.01),显著增加了体重(P<0.01),显著减少了卵囊排出数量(P<0.05),显著减轻了盲肠病变(P<0.05)。根据存活率、相对增重率、盲肠病变计分、卵囊值计算得出的抗柔嫩艾美耳球虫指数为165。结果表明,pSMART2b-Etgam22具有良好的抗柔嫩艾美耳球虫保护效果。

• 单位
  河南牧业经济学院; 医药学院; 吉林大学