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摘要
目的探讨LOC103693069对BMSCs缺氧性凋亡的作用。方法取1周龄SD大鼠骨髓，采用全骨髓贴壁培养法分离培养BMSCs并传代，经成脂、成软骨和成骨诱导分化鉴定后，取第3代细胞分别采用5%O2、1%O2及无氧条件处理48 h，检测细胞活性、凋亡以及凋亡相关蛋白[低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α，HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病基因2(B cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)]表达，以正常BMSCs作为对照，确定细胞凋亡最明显的浓度组用于后续实验。取缺氧处理48 h后BMSCs，通过基因芯片以及实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)分析，筛选表达下调最显著基因并构建其高表达、低表达以及阴性对照慢病毒并转染BMSCs，经qRT-PCR检测明确转染成功后，缺氧处理48 h观察细胞活性及凋亡相关蛋白表达。结果经细胞活性、凋亡以及凋亡相关蛋白检测，以无氧条件培养48 h后细胞凋亡最显著，上述指标与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.05)，以该组处理条件进行后续实验。基因芯片分析示缺氧处理48 h后，BMSCs中AC125847.1、LOC102547753、AABR07017208.2、LOC103693069明显下调，qRT-PCR检测LOC103693069表达下调最显著(P<0.05)；选择其构建慢病毒并转染BMSCs,qRT-PCR检测示成功转染至细胞；经缺氧处理后检测显示该基因高表达的BMSCs凋亡率和凋亡相关蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论LOC103693069可改善BMSCs缺氧性凋亡。
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