基于差异表达基因研究探讨冠心病心绞痛模型大鼠穴位痛敏化的发生机制

作者：刘雪莹; 付红娟; 任彦蓉; 齐文川; 梁繁荣^*

来源：环球中医药, 2023, 16(09): 1743-1751.

DOI：10.3969/j.issn.1674-1749.2023.09.005

• 冠心病心绞痛
• 穴位痛敏化
• 转录组测序
• 实时荧光定量PCR

目的 应用第二代测序技术对冠心病心绞痛模型大鼠敏化穴位组织中的差异性表达mRNA进行生物信息学分析，探讨参与穴位痛敏化发生过程的mRNA及其可能调控机制。方法 将20只雄性SD大鼠随机分为空白组和模型组，每组10只，通过腹腔注射盐酸异丙肾上腺素构建大鼠冠心病心绞痛模型，腹腔注射生理盐水构建空白对照组，两组的注射剂量均为2 mg/kg,每24小时注射1次，连续注射14天。检测大鼠造模前、造模后心电图，记录大鼠心电图变化情况；采用苏木素—伊红染色观察大鼠心肌组织病理形态变化；采集大鼠左侧背斜方肌肌电信号，观察大鼠心脏是否产生疼痛反应；采用Electric VonFrey测痛仪于造模前、造模后检测空白组和模型组大鼠双侧内关穴、尺泽穴和非经非穴的机械痛阈值，并计算痛阈值变化率，判断穴位是否发生痛敏化；取模型组大鼠敏化穴位和空白组大鼠对应穴位的皮肤及皮下组织进行转录组测序，筛选出差异表达的mRNA,并对其进行GO富集分析和KEGG信号通路分析，确定其生物学功能；运用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)方法验证部分显著差异mRNA的表达水平。结果 与空白组比较，模型组大鼠双侧内关穴的机械痛阈值显著降低(P<0.05);模型组与空白组比较，共筛选出差异表达基因45个，挑选出9个差异表达基因进行RT-qPCR验证，结果显示Adam11基因表达显著上调(P<0.05),与转录组测序结果一致。结论 冠心病心绞痛模型大鼠敏化穴位(内关穴)皮肤及皮下组织中Adam11基因可能与穴位痛敏化发生的调控机制有关，有待进一步研究。

• 单位
  成都中医药大学; 山西中医药大学; 广州中医药大学深圳医院; 第二临床学院