睾丸组织中的TSP50启动子甲基化差异的研究

作者:茅淑砚; 杨明; 蒲春雪; 吕静静; 王悦增
来源:中国免疫学杂志, 2011, 27(09): 796-799.
DOI:10.3969/j.issn.1000-484X.2011.09.008

摘要

目的:检测不同组织中TSP50启动子区域的甲基化状态,研究其表达的机制。方法:分离、纯化鼠睾丸中的精原细胞、精母细胞和精子,分别提取人的睾丸组织、Ntera-2细胞、鼠精原细胞、精母细胞和精子的基因组DNA,用重亚硫酸盐处理基因组DNA,PCR扩增人和鼠的TSP50的启动子CpG岛区域,电泳,提纯,连接于质粒中,转导入细胞中,扩增,提取,纯化质粒,测序。结果:人睾丸组织甲基化水平较低,Ntera-2细胞处于较高水平。鼠的精原细胞和精子细胞甲基化水平较高,精母细胞甲基化水平较低。结论:TSP50启动子区域甲基化位点的甲基化水平调控TSP50蛋白的表达。

全文