ALC对缺氧精原细胞线粒体呼吸功能及自噬的影响

作者：蓝贤娜; 李敏瑜; 乔娜; 陈汉明; 曾绮雯; 刘冰贤; 庞聪颖; 唐兆新; 李英^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (11): 6-16.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.09.0194

• 乙酰左旋肉碱(ALC)
• 缺氧
• 线粒体功能
• 呼吸指标
• 自噬
• 精原细胞

为了探讨乙酰左旋肉碱(ALC)对缺氧条件下小鼠精原细胞线粒体呼吸功能与自噬的影响,试验以GC-1精原细胞系为研究对象,将其分为3组,分别为对照组(5%CO2和95%空气)、缺氧组(5%CO2和3%O2)和缺氧+ALC组(5%CO2和3%O2,培养基中添加150 mmol/L的ALC),各组细胞经相应条件处理24 h后,以高分辨率呼吸仪检测线粒体呼吸功能相关指标的变化,使用实时荧光定量PCR方法检测自噬相关基因的相对表达量,通过Western-blot法检测自噬相关蛋白的表达情况。结果表明:与对照组相比,缺氧组GC-1精原细胞线粒体基础呼吸、质子漏、ATP相关呼吸、线粒体最大呼吸、备用呼吸能力和呼吸控制比率均极显著降低(P<0.01),剩余氧通量升高但差异不显著(P>0.05),而添加ALC后对缺氧诱导的上述指标的变化无明显改善作用(P>0.05)。与对照组相比,缺氧组ATG5、Beclin1、p62基因相对表达量极显著下调(P<0.01),LC3b基因相对表达量轻微上调但差异不显著(P>0.05),Beclin1、ATG5、LC3b/LC3a蛋白相对表达量显著下调(P<0.05)。与缺氧组相比,添加ALC显著或极显著逆转缺氧诱导的自噬相关基因ATG5、Beclin1、p62相对表达量的下调(P<0.05或P<0.01),同时添加ALC显著上调LC3b基因相对表达量(P<0.05);LC3b/LC3a蛋白相对表达量极显著上调(P<0.01),而ATG5、Beclin1蛋白相对表达量呈上调趋势但差异不显著(P>0.05)。说明ALC可能激活缺氧环境下诱导的GC-1精原细胞自噬抑制,但不能逆转线粒体呼吸功能障碍。

• 单位
  华南农业大学