扬子鳄α型干扰素蛋白的原核表达和纯化及其多克隆抗体的制备

作者：白艺兰; 费荣梅^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(02): 184-189.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0041

• IFN-α
• 扬子鳄
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 多克隆抗体

为了进一步研究扬子鳄IFN-α，构建原核表达载体pET32a-IFN，导入大肠杆菌表达系统后诱导表达，并纯化靶蛋白。使用纯化重组蛋白作为抗原，加入佐剂乳化后免疫3只雌性的6周龄BALB/c小鼠，免疫后第35天对小鼠采血分离血清并测定效价。结果显示，成功构建原核表达载体pET32a-IFN,Western-blot鉴定显示，扬子鳄IFN-α重组蛋白成功表达，大小与预期相符，约为43 ku；免疫后的1号和2号小鼠所产生的多克隆抗体效价均为1∶51 200,3号小鼠所产生的多克隆抗体效价为1∶25 600，具有良好的特异性，这为后续扬子鳄IFN-α抗病毒的研究奠定了基础。

• 单位
  上海市动物疫病预防控制中心; 南京农业大学