牛乳中沙门氏菌的荧光定量PCR检测方法的建立

作者：姚笛; 徐磊; 佐兆杭; 侯婷婷; 郭瑜

来源：中国乳品工业, 2019, 47(07): 42-45.

• 荧光定量PCR
• 沙门氏菌
• invA基因

为建立一种牛乳中沙门氏菌的荧光定量PCR快速检测方法,根据沙门氏菌invA基因序列和荧光定量PCR要求设计了合适的特异性引物,然后提取菌体DNA,对目的基因进行克隆,以重组质粒为模板进行荧光定量PCR扩增,绘制标准曲线,以沙门氏菌DNA为模板进行荧光定量PCR扩增,确定其扩增条件。结果表明,建立的方法特异性强,与志贺氏菌等致病菌无交叉反应,且方法的灵敏度高(为0.1 ng/L)。以掺入沙门氏菌的牛乳为样品,可检测到牛乳中44.2 mL-1的沙门氏菌。该方法适用于快速、准确检测牛乳中的沙门氏菌,为实验室快速检测致病菌提供参考。

• 单位
  黑龙江八一农垦大学