HIF-1α基因表达沉默对肝癌细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的研究

作者：倪嘉延; 吴裕丹; 许林锋; 孙宏亮; 陈耀庭

来源：中华肿瘤防治杂志, 2014, 21(05): 356-359.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2014.05.010

• 肝肿瘤
• 缺氧诱导因子-1α
• RNA干扰
• 血管内皮生长因子
• 蛋白激酶B

目的:探讨沉默缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因表达对肝癌细胞PI3K/AKT信号转导通路的影响。方法:选用大鼠CBRH-7919肝癌细胞株作为研究对象,利用氯化钻(CoCl2)建立厌氧模型。构建HIF-1α小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异性载体复合物,小分子RNA干扰技术沉默肝癌细胞HIF-1α的基因表达,分别利用RT-PCR和免疫印迹法检测肝癌细胞HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷酸化AKT(p-AKT)、AKT和PI3K在mRNA和(或)蛋白水平的表达变化。结果:肝癌细胞在缺氧条件下表达HIF-1α较常氧对照组显著增多,差异具有统计学意义,PmRNA=0.002,P蛋白=0.003。特异性HIF-1αsiRNA表达载体转染肝癌细胞后,肝癌细胞HIF-1α(PmRNA和P蛋白均<0.001)、VEGF(PmRNA=0.001,P蛋白<0.001)和p-AKT(P蛋白<0.001)的表达明显减少;AKT和PI3K的表达显著增多,与对照组的差异均具有统计学意义,P蛋白值分别为0.032和0.020。结论:特异性siRNA干扰沉默HIF-1α基因表达可抑制肝癌细胞PI3K/AKT信号转导通路的激活。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院