miR–100通过Akt/mTOR信号通路对胃癌细胞增殖的负调控作用

作者：郭利华; 胡桂梅; 丁勇; 王静静; 叶国良^*

来源：中国现代医生, 2022, 60(28): 41-53.

• 胃癌
• miR–100
• 增殖
• 细胞周期
• 凋亡
• Akt/mTOR信号通路

目的 探讨miR–100对胃癌细胞的生物学作用及对蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mT OR）信号通路的调控作用。方法 应用定量反转录聚合酶链反应（quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT–PCR）检测人胃癌细胞株BGC–823、SGC–7901、MKN–45和胃黏膜上皮细胞株GES–1中miR–100的表达差异；将人工合成的miR–100模拟剂（mimics）及阴性对照转染至人胃癌细胞株BGC–823中，使用CCK–8法检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡；应用双荧光素酶报告基因验证miR–100靶基因，应用qRT–PCR和蛋白质印迹法分析Akt/mTOR信号通路相关基因及蛋白表达水平。结果 胃癌细胞株miR–100的表达水平显著低于胃黏膜上皮细胞株（P<0.05）；转染后48h、72h,miR–100 mimcs组吸光度值均显著低于对照组（P<0.05）；流式细胞术显示miR–100mimics组G0/G1期细胞比率显著高于对照组（P<0.05）,S期、G2/M期细胞比率均显著低于对照组（P<0.05）;miR–100mimics组细胞凋亡率与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；双荧光素酶报告显示miR–100 mimics组野生型mT OR荧光酶活性被抑制（P<0.05）;miR–100 mimics组胃癌细胞Akt、mT OR、p70S6K的mR NA及蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）。结论 miR–100在胃癌细胞中表达降低，miR–100可靶向调控mT OR抑制胃癌细胞增殖，阻碍细胞周期进程。

• 单位
  宁波大学医学院附属医院