摘要

目的探讨Toll样受体-4(TLR4)沉默对高糖诱导胰岛微血管内皮细胞损伤的干预作用及机制。方法利用siRNA沉默MS-1细胞中TLR4的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TLR4 mRNA的表达,CCK-8法检测细胞增殖,比色法测定一氧化氮水平,ELISA检测内皮素-1水平,羟胺法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸(TBA)法检测丙二醛水平,蛋白免疫印迹法检测TLR4、髓样分化因子88(MyD88)和核转录因子(NF)-κBp65蛋白的表达。将高糖处理的细胞分为高糖组及siRNA处理组(再分为siRNA-TLR4组及NC-TLR4组)进行上述指标的比较。结果与高糖组比较,siRNA-TLR4组TLR4 mRNA的相对表达水平降低,细胞的增殖能力受抑制(P均<0.05)。此外,与高糖组比较,siRNA-TLR4组一氧化氮水平、SOD活力升高,内皮素-1、丙二醛水平下降(P均<0.05)。与高糖组比较,siRNATLR4组TLR4、MyD88和NF-κBp65蛋白减少(P均<0.05)。结论沉默TLR4在MS-1细胞中的表达水平,减弱TLR4/NF-κB信号通路传递的炎症水平,间接降低氧化应激水平,从而改善高糖诱导的胰岛微血管内皮细胞损伤。

  • 单位
    宁波市鄞州人民医院