猪ACSM3基因过表达/敲减质粒的构建

作者：张冬杰; 柳樱子; 汪亮; 杨秀芹; 刘娣^*

来源：安徽农业大学学报, 2022, 49(04): 574-577.

DOI：10.13610/j.cnki.1672-352x.20220907.013

• 猪
• ACSM3基因
• 脂肪细胞
• 过表达
• 敲减

脂肪主要由甘油和脂肪酸组成，酰基辅酶A合成酶中链家族成员3(Acyl-CoA medium-chain synthetase3,ACSM3)是脂肪酸代谢第一步反应中的关键酶。为了深入研究ACSM3基因的生物学功能，采用克隆、测序、双酶切、连接等分子生物学技术，将ACSM3基因的完整编码区连入pcDNA3.1(+)载体内，构建该基因的过表达质粒；通过生物合成技术，构建该基因的敲减质粒。然后利用体外培养的猪前体脂肪细胞，检测ACSM3基因的过表达/敲减质粒的作用效果。结果表明，成功构建了ACSM3基因的过表达质粒，该质粒的过表达效果可一直持续到转染后的第8天。从3条特异性干扰序列中筛选出1条具有显著敲减效果的序列，敲减作用可持续到转染后的第2天。本研究所构建的过表达/敲减质粒，可为后续的ACSM3基因的功能研究提供有力的技术支持。

• 单位
  黑龙江省农业科学院; 东北农业大学