摘要

中性粒细胞释放的胞外诱捕网(NETs)是一把双刃剑,了解NETs的形成机制对疾病治疗具有重要意义。然而,寿命短、个体差异大以及无法进行基因编辑使得中性粒细胞难以被用来破译NETs的形成。因此,寻找模式细胞替代中性粒细胞来研究NETs的形成机制是非常有必要的。在本研究中,我们使用不同浓度(0、0.1、1和10μmol/L)的全反式维甲酸(ATRA)对HL-60细胞进行不同天数的分化(1、3、5和7天)。通过检测细胞活力和细胞核形态,我们证实HL-60细胞经ATRA处理5天后可以分化为中性粒细胞样细胞(dHL-60)。使用免疫荧光染色检测NETs的形成,结果表明1μmol/L的ATRA分化5天得到的dHL-60细胞在佛波酯(PMA)刺激下产生的NETs与中性粒细胞产生的相当,且都不伴随组蛋白H3瓜氨酸化。此外,dHL-60细胞形成的NETs依赖于NADPH而不依赖于PAD4,这与中性粒细胞一致。这些结果表明,经1μmol/L ATRA分化5天的dHL-60细胞可作为中性粒细胞的模式细胞,用于NETs形成机制的研究。