小反刍兽疫实时荧光定量RT-PCR方法的建立

作者:师亚玲; 韩佃刚; 董俊; 叶玲玲; 李静; 陈朝林; 信吉阁; 艾军*
来源:中国口岸科学技术, 2022, S1: 57-62.

摘要

建立快速特异的小反刍兽疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法,用于小反刍兽疫的初步筛查。选用国标GB/T27982-2011小反刍兽疫诊断技术中根据PPRV N基因设计的特异性引物探针,建立Taq Man实时荧光定量RT-PCR检测方法。该检测方法具有良好的特异性,与蓝舌病、口蹄疫、山羊痘、羊口疮等常见牛羊病毒均无交叉反应。标准曲线线性相关系数为R2=0.9828,最低检测限为6.8 copies·μL-1,组内变异系数均低于2%,组间变异系数均低4%。结果表明,本研究建立的实时荧光定量RT-PCR方法具有良好的特异性、较高的敏感性和稳定性。