miR-99a通过下调RRM2抑制人子宫颈癌HeLa细胞系增殖、迁移和侵袭

作者：贺春花; 刘冷^*; 张小柳

来源：基础医学与临床, 2022, 42(11): 1737-1743.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2022.11.1737

• miR-99a
• 核糖核苷酸还原酶小亚基M2
• 宫颈癌细胞
• 增殖
• 迁移

目的 探讨miR-99a与核糖核苷酸还原酶小亚基M2(RRM2)的靶向关系，并分析二者对人子宫颈癌(CC)HeLa细胞系增殖、侵袭及迁移的影响。方法 将HeLa细胞，分为对照组(control)、阴性对照组(inhibitor-NC)、抑制miR-99a表达组(miR-99a-inhibitor)、共转染组(RRM2-siRNA+miR-99a-inhibitor)。MTT法、平板集落实验检测细胞增殖；划痕实验、Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭；Western blot检测RRM2、细胞增殖核抗原(PCNA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、N-钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)蛋白表达；免疫荧光法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin定位及表达；生物信息学及双荧光素酶报告基因实验验证miR-99a与RRM2靶向关系；RT-qPCR检测细胞中miR-99a、RRM2 mRNA水平。结果 下调miR-99a表达，可增高HeLa细胞增殖率(100.00比128.86±4.25,P<0.05);上调集落形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数；增加RRM2、PCNA、N-cadherin与vimentin蛋白表达，降低E-cadherin蛋白表达(P<0.05)。抑制RRM2表达能减轻下调miR-99a对HeLa细胞生物学行为的影响(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验及RT-qPCR证实miR-99a与RRM2存在靶向关系(P<0.05)。结论 抑制miR-99a可能靶向上调RRM2表达并促进HeLa细胞增殖，有望成为CC新的潜在治疗靶点。

• 单位
  荆门市第一人民医院