DNA修复相关蛋白RAD51在宫颈癌细胞增殖中的作用

作者：卢晓宁; 丁沐阳; 李岐佩; 冯晓珊; 李牧; 吴晓玲^*

来源：山西医科大学学报, 2018, 49(08): 920-926.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2018.08.009

• RAD51
• RI-1
• 宫颈癌
• 细胞增殖
• 裸鼠
• 移植瘤
• 流式细胞术

目的研究DNA修复相关蛋白RAD51对人宫颈癌细胞He La和Si Ha增殖能力的影响及其可能的机制。方法应用免疫组化检测RAD51蛋白在43例人正常宫颈,64例宫颈鳞状细胞癌组织中的表达情况;采用细胞计数法、MTT实验分析RAD51抑制剂RI-1处理(实验组1)和DMSO处理(对照组1)的人宫颈癌细胞He La和Si Ha细胞体外增殖的变化;用RI-1(实验组2)和等体积生理盐水(对照组2)腹腔灌注于成功移植He La或Si Ha细胞的裸鼠,分析裸鼠移植瘤瘤体生长、体积及质量的变化。采用流式细胞术检测各组细胞周期分布。Western blot检测抑制RAD51蛋白对细胞周期蛋白cyclin D1与P21水平的影响。结果 RAD51蛋白在宫颈癌组织中的表达水平[73.44%(47/64)]明显高于正常宫颈组织[13.95%(6/43)]。与对照组1相比,实验组1 He La及Si Ha细胞中RAD51表达明显抑制,其细胞生长速度及活性也明显降低(均P<0.01),且具有时间依赖效应;实验组2裸鼠移植瘤的生长明显减慢,且所成瘤体的平均质量均显著减小(P<0.01)。流式细胞术提示RAD51抑制剂处理后阻断细胞周期的转换。Western blot检测证实RI-1处理后降低了细胞周期蛋白cyclin D1和增加了P21的表达,进而阻断细胞周期的转换。结论 RAD51通过调节cyclin D1与P21蛋白表达水平引起细胞周期进展停滞,改变宫颈癌细胞及移植瘤体的生长。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院