摘要

目的 研究诃子水提取物(TCWE)对胶原蛋白诱发关节炎(CIA)大鼠细胞免疫及程序性死亡蛋白1/程序性死亡蛋白1配体1(PD-1/PD-L1)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、CIA组、TCWE处理、甲氨蝶呤(MTX)处理组,每组15只。除对照组外,其余各组SD大鼠皮下注射Ⅱ型胶原蛋白制备胶原蛋白诱发关节炎(CIA)模型,TCWE组大鼠采用20mg/(kg·d)TCWE处理,MTX组大鼠采用1.67mg/(kg·d)MTX处理。处理14d后,通过HE染色检查软骨形态,流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞凋亡和调节性T细胞(Treg)/Th17细胞比率,反转录PCR检测脾脏中的维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)和叉头盒转录因子P3(FOXP3)、程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)和程序性细胞死亡蛋白1配体(PD-L1)的mRNA表达,免疫组织化学染色检测RORγt、FOXP3的表达和定位。Westernblot法检测脾脏PD-1和PD-L1的蛋白表达,ELISA检测大鼠血清白细胞介素17(IL-17)和转化生长因子β(TGF-β)水平。结果 与CIA组相比,TCWE处理组和MTX处理组的软骨和滑膜病变明显减轻,脾脏中的T淋巴细胞凋亡率增加,Treg/Th17细胞比率上调,RORγt的表达降低,FOXP3、PD-1和PD-L1的表达增加。血清IL-17水平降低,血清TGF-β水平升高。结论TCWE处理可能激活PD-1/PD-L1通路调节CIA大鼠细胞免疫,减轻软骨损伤。

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