BDV核蛋白FQ RT-PCR试剂盒的评价与应用

作者：徐鸣明; 展群岭; 张英英; 张亮; 宋武琦; 张凤鸣; 谢鹏

来源：微生物学通报, 2010, 37(02): 239-245.

DOI：10.13344/j.microbiol.china.2010.02.025

• 博尔纳病病毒
• 实时荧光定量PCR
• 核蛋白

为评价博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)核蛋白荧光定量PCR(FQRT-PCR)试剂盒的各项指标,比较分子信标探针相对普通探针的优势,并了解其实际检测效果,本课题组使用BDVOL持续感染细胞株、非BDV病毒序列转染的OL细胞、正常的OL细胞,对BDVRT-PCR试剂盒的敏感性、特异性、重复性和稳定性进行评估,同时检测部分临床病人和动物外周血液RNA。实验结果显示:试剂盒可以检测出的病毒RNA最低浓度为2.5×101,相当于1个病毒拷贝数,无非特异检出;不同批次的试剂盒的检测结果变异系数小于0.7;加速破坏的试剂盒和正常试剂盒检测结果之间变异系数在2以内;对临床病人检测阳性率为3.6%,对动物检测阳性率为4.2%(猪)和1.5%(马)。可见该试剂盒重复性和稳定性均好;敏感性、特异性优于普通探针试剂盒,是BDV基础研究、流行病学调查和临床检测的良好工具。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院; 哈尔滨医科大学; 神经内科