miR-103通过NF-κB通路上调MGMT表达诱导胃癌细胞紫杉醇耐药

作者：高晓丹^*; 王丽洁; 王书梦; 苏洁

来源：浙江中西医结合杂志, 2022, 32(10): 907-917.

• 微小RNA-103
• 核转录因子-κB抑制蛋白α
• 核转录因子-κB
• O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶
• 紫杉醇
• 胃癌
• 耐药

目的 观察miR-103在胃癌细胞紫杉醇（PTX）耐药中的作用，并探讨其作用机制。方法构建PTX耐药胃癌NCI-N87细胞（N87/PTX）;N87/PTX细胞转染miR-103 inhibitor和阴性对照，分别设为miR-103 inhibitor组和阴性对照组（NC），同时以未转染的N87/PTX细胞作为空白对照组（Control）。四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞活力；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-103表达水平；生物信息学分析miR-103的靶基因；结晶紫染色法检测细胞贴壁存活率；免疫荧光法检测细胞NF-κB p65定位；蛋白印记法检测p-NF-κB p65、IKBα、MGMT蛋白表达变化。结果N87/PTX细胞耐药指数为27.1。与正常N87细胞比较，N87/PTX细胞miR-103表达水平显著升高（P<0.01）。miR-103 inhibitor可显著降低PTX对N87/PTX细胞的IC50(P<0.01)，增强N87/PTX细胞对PTX的敏感性（P<0.01）。IKBα蛋白的编码基因NFKBIA与miR-103存在互补结合位点。与正常N87细胞比较，N87/PTX细胞IKBα表达明显下调，p-NF-κBp65和MGMT表达显著升高（P均<0.01）。抑制miR-103可上调IKBα蛋白表达，下调p-NF-κB p65和MGMT蛋白表达（P均<0.01）。结论 miR-103可能通过降解IKBα诱导NF-κB p65入核，NF-κB p65增强MGMT转录表达从而介导胃癌细胞对PTX耐药。