60Coγ射线照射对人脐静脉内皮细胞线粒体结构和功能的影响

作者：闫凯欣; 赵亚伟; 王溢豪; 易静; 段晗; 陶宁; 王华^*; 胡舜英^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2022, 36(09): 657-664.

DOI：10.3867/j.issn.1000-3002.2022.09.003

• γ射线
• 血管内皮细胞
• 线粒体功能
• 线粒体分裂

目的 探讨60Coγ射线照射对血管内皮细胞线粒体结构和功能的影响。方法 分别采用60Coγ射线0(细胞对照组)，5,10和20 Gy单次照射人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，照射后24和48 h，采用流式细胞术检测细胞凋亡；荧光探针H2DCF-DA标记，用激光共聚焦显微镜检测细胞产生活性氧(ROS)水平；JC-1探针标记，分别用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位；通过钙黄绿素-AM探针标记，激光共聚焦显微镜定性检测线粒体膜通道孔(mPTP)开放状态；电镜观察线粒体结构变化；Western印迹法检测线粒体分裂相关标志物磷酸化动力相关蛋白1(p-Drp1)和磷酸化线粒体分裂因子(p-Mff)蛋白表达水平。结果 与细胞对照组相比，照射后24和48 h,5,10和20 Gy组细胞凋亡率增加(P<0.01)，细胞ROS水平增加(P<0.05,P<0.01)，细胞mPTP开放增加(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术和荧光显微镜检测结果显示，与细胞对照组相比，照射后24和48 h,5,10和20 Gy组线粒体膜电位下降(P<0.01)。电镜观察显示，与细胞对照组相比，照射组照射后48 h，单个线粒体面积增加(P<0.05,P<0.01)，单个线粒体周长增加(P<0.05)，线粒体密度下降(P<0.05,P<0.01)，异常线粒体数量大幅增加(P<0.01)。与细胞对照组相比，各照射组照射后48 h,p-Drp1和p-Mff蛋白表达水平均显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论60Coγ射线照射加重血管内皮细胞线粒体损伤，促进线粒体分裂，诱发线粒体功能障碍。

• 单位
  生命科学学院; 安徽医科大学; 解放军总医院