血管紧张素Ⅱ正向调节高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞TLR4信号及炎性因子表达

作者：吕金雷; 徐建华; 付志晖; 姜和; 王缨; 罗来敏; 陈钦开

来源：中华肾脏病杂志, 2013, 29(12): 908-913.

• 血管紧张素Ⅱ
• 肾小球系膜细胞
• Toll样受体4
• 高糖
• 炎性因子

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞Toll样受体4(TLR4)信号通路与炎性因子表达的影响,论证AngⅡ对岛糖环境下肾小球系膜细胞天然免疫炎性反应的正向调节作用。方法细胞同步化后分组:正常对照(5.6 mmol/L葡萄糖)组、高糖(25 mmol/L葡萄糖)组、AngⅡ(10~(-7)mmol/L)组、高糖(25 mmol/L葡萄糖)+AngⅡ(10~(-7)mmol/L)组和AngⅡ(10~(-7)mmol/L)+血管紧张素1型受体(AT1R)阻断剂厄贝沙坦(10~(-5)mmol/L)组和AngⅡ/(10~(-7)mmol/L)+厄贝沙坦(10~(-5)mmol/L)+TLR4阻断剂(10 mg/L)组。分别于不同时间收集细胞,12 h时采用实时定量PCR检测TLR4及其转接子髓分化因子88(MyD88)的表达,24 h时免疫荧光检测TLR4蛋白表达,24 h时Western印迹法检测TLR4、MyD88及核因子κB(NF-κB)蛋白的表达,同时收集24 h时细胞上清液用ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的水平。结果与正常对照组相比,高糖和AngⅡ组作用12 h时TLR4、MyD88 mRNA表达显著上调(P<0.01),24h时TLR4、MyD88以及NF-κB蛋白表达显著上调(P<0.01).同时炎性细胞因子IL-6、MCP-1水平亦显著上调(P<0.01);与高糖或AngⅡ组相比,AngⅡ和高糖共同作用肾小球系膜细胞后TLR4、MyD88和NF-κB蛋白以及IL-6、MCP-1的水平进一步上调(P<0.01);ATIR、TLR4阻断剂可显著下调AngⅡ诱导的高糖环境下系膜细胞TLR4、MyD88表达及IL-6、MCP-1水平(P<0.01)。结论高糖和高肾素导致大鼠肾小球系膜细胞炎性因子表达增加均与TLR4-MyD88信号通路的激活相关,TLR4信号通路在糖尿病系膜细胞天然免疫炎性反应机制中发挥关键效应。AngⅡ对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞炎性因子释放起正向调节作用。

• 单位
  南昌大学第一附属医院